| Registro completo |
| Provedor de dados: |
Thai Agricultural
|
| País: |
Thailand
|
| Título: |
ผลของการเสริม Ethidium bromide หรือ CuSO4 ในปฏิกิริยา Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) ต่อการเพิ่มความแม่นยำในการคัดเพศตัวอ่อนโคเนื้อ
Effect of ethidium bromide or CuSO4 supplements in LAMP reaction on greater accuracy of sexing cattle embryos
|
| Autores: |
Saruttiwong Boonkong
Chainarong Navanukraw
Tossapol Moonmanee
Jiratti Thammasiri
Vilaivan Khanthusaeng
Aree Kraisoon
|
| Data: |
2015-06-11
|
| Ano: |
2013
|
| Palavras-chave: |
Cattle
Bovine
Oocyte
LAMP reaction
Loop-mediated isothermal amplificatio
Ethidium bromide
EB
CuSO4
CS
DNA
Sexing embryo
In vitro fertilization
IVF
โคเนื้อ
โอโอไซต์
ลักษณะทางสัณฐานวิทยา
การคัดเพศตัวอ่อน
เทคนิคการคัดเพศ
ดีเอ็นเอ
ความแม่นยำ
|
| Resumo: |
The study was conducted to determine effect of EB or CS supplements in LAMP reaction on greater accuracy of sexing cattle embryos. Bovine ovaries were collected from the slaughterhouse, oocytes were aspirated from follicles then were evaluated morphology. Oocytes were cultured in TCM-199 at 38.5 ºC 24 h. For in vitro fertilization (IVF), oocytes were co-incubated with spermatozoa at 38.5 ºC 24 h. Fertilization rate was evaluated and then the embryos were in vitro cultured until morula stage. Then, embryo samples were frozen and stored at -196 ºC. Frozen embryos (n=35) were randomly extracted for total cellular DNA and amplified by PCR method. DNA samples were stored at -20 ºC. Sexing was determined by modification of LAMP method with either 1mM EB or 1M CS supplementation. The result found that percentages of sex detection in bovine was greater (P<0.01) in EB supplemented than CS and control groups (100.0, 74.3 and 57.2%, respectively). Percentages of accuracy of sexing bovine embryo supplemented with EB was the greatest, followed by the LAMP+CS and the control (42.5, 35.0 and 22.5%, respectively). Based on this study, conclusions were as follows. The LAMP reaction application by using 1 mM EB effectively increased the accuracy of sexing bovine embryos and supplemented with 1 M CS did not increase accuracy of sexing bovine embryos
การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อเพิ่มความแม่นยำในการคัดเพศตัวอ่อนโคเนื้อโดยการเสริม ethidium bromide (EB) หรือ CuSO4 (CS) ในปฏิกิริยา LAMP ทำการเก็บรังไข่โคเนื้อจากโรงฆ่าสัตว์ นำมาเจาะดูดโอโอไซต์จากฟอลลิเคิล ประเมินอัตราการเก็บโอโอไซต์และลักษณะทางสัณฐานวิทยา เพาะเลี้ยงใน TCM-199 ที่ 38.5 ºซ เป็นเวลา 24 ชั่วโมง กระทั่งได้โอโอไซต์ที่เจริญพร้อมปฏิสนธิ ทำการปฏิสนธิและเพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 38.5 ºซ เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ประเมินอัตราการปฏิสนธิ จากนั้นเพาะเลี้ยงตัวอ่อนต่อไปอีกจนถึงระยะมอรูล่า ทำการแช่แข็งตัวอ่อน และเก็บตัวอ่อนที่อุณหภูมิ -196 ºซ เพื่อรอการคัดเพศ สุ่มตัวอย่างตัวอ่อนโคเนื้อจำนวน 35 ตัวอย่าง เพื่อสกัด DNA และเพิ่มจำนวนโดยวิธี PCR เก็บตัวอย่าง DNA ไว้ที่อุณหภูมิ -20 ºซ แล้วนำมาคัดเพศโดยวิธี LAMP แบ่งเป็น 3 ทรีทเมนต์ ได้แก่ กลุ่มควบคุม กลุ่ม LAMP เสริมด้วย 1 mM EB และ กลุ่ม LAMP เสริมด้วย 1 M CS ผลการศึกษาพบว่า เปอร์เซ็นต์การคัดเพศในโคเนื้อโดยการเสริม EB ให้ผลดีกว่าการเสริมด้วย CS และกลุ่มควบคุม (P<0.01) (100.0, 74.3 และ 57.2% ตามลำดับ) ความแม่นยำในโคเนื้อโดยการเสริม EB สูงที่สุด รองลงมา คือ การเสริม CS และกลุ่มควบคุม (P>0.05) (42.5, 35.0 และ 22.5% ตามลำดับ) ดังนั้นสรุปได้ว่า การประยุกต์ใช้ปฏิกิริยา LAMP โดยการเสริม EB ที่ความเข้มข้น 1 mM สามารถเพิ่มความแม่นยำในการคัดเพศตัวอ่อนโคเนื้อได้อย่างมีประสิทธิภาพ และการเสริม CS ที่ความเข้มข้น 1 M ไม่สามารถเพิ่มความแม่นยำในการคัดเพศตัวอ่อนโคเนื้อได้
|
| Tipo: |
PhysicalObject
|
| Idioma: |
Thailandês
|
| Identificador: |
ISSN 0125-0485
http://anchan.lib.ku.ac.th/agnet/handle/001/5813
Khon Kaen Agriculture Journal (Thailand), ISSN 0125-0485, 2013, V. 41, Suppl. 1, p. 51-56
แก่นเกษตร, ISSN 0125-0485, 2556, ปีที่ 41, ฉบับพิเศษ 1, หน้า 51-56
|
| Direitos: |
ลิขสิทธิ์เป็นของเจ้าของบทความแต่เพียงผู้เดียว
สงวนลิขสิทธิ์ตามพระราชบัญญัติลิขสิทธิ์ พ.ศ. 2537
เอกสารนี้สงวนไว้สำหรับการใช้งานเพื่อการศึกษาเท่านั้น ไม่อนุญาตให้นำไปใช้ประโยชน์ด้านการค้า ไม่ว่ากรณีใดๆ ทั้งสิ้น อีกทั้งห้ามมิให้ดัดแปลงเนื้อหา และต้องอ้างอิงถึงเจ้าของเอกสารทุกครั้งที่มีการนำไปใช้
|
|
